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液相測定化妝品中的米諾地爾(HPLC)

更新時間:2015-04-07        閱讀:4145

引言

米諾地爾是治療雄性脫發(fā)的主要成分,可以刺激毛囊上皮細(xì)胞的增殖和分化,促使血管生成。實(shí)驗(yàn)顯示米諾地爾是鉀通道激活劑,可增加鉀離子的通透性,阻止鈣離子流人細(xì)胞內(nèi),結(jié)果導(dǎo)致細(xì)胞中游離鈣離子濃度下降,而有鈣離子時,表皮生長因子抑制毛發(fā)生長。但是過多地使用米諾地爾,可能會對人體產(chǎn)生不同程度的副作用。上海伍豐科學(xué)儀器有限公司采用液相色譜法測定了市售米諾地爾酊中米諾地爾的含量,旨在為控制該藥劑質(zhì)量提供可靠地依據(jù)。

關(guān)鍵詞:液相 米諾地爾

1 儀器與藥品

伍豐LC-100等度系統(tǒng)。包括泵LC-100P,柱溫箱LC-100 CO,檢測器UV-100

自動進(jìn)樣器Arcus 5 自動進(jìn)樣器等。超聲波清洗機(jī),PH計(jì),電子天平。

米諾地爾對照品(中國藥品生物制品檢定所)

米諾地爾酊(匯豐大藥房)

甲醇為HPLC級,磷酸氫二鉀為分析純

2 分析條件

色譜柱:XB-C18,4.6×250mm,5 μm

流動相: A:B=5545

A相:0.03 mol/L K2HPO4溶液(PH=3.4  B相:甲醇

流速:    1 mL/min

檢測波長:UV285 nm

進(jìn)樣量:  10 μL

柱溫:    30

3 樣品處理

對照品:稱取10.3 mg米諾地爾對照品置于100 mL容量瓶中,用甲醇定容,配置成0.103 mg/mL的對照品溶液。

樣品:精密量取市售米諾地爾酊(規(guī)格3g/60 mL1 mL,用甲醇稀釋得到0.05 mg/mL的供試品溶液。

4 方法學(xué)考察

4.1 線性關(guān)系考察

精密量取對照品溶液適量,用甲醇稀釋成2.06 mg/L, 5.15 mg/L,8.24 mg/L, 10.30 mg/L, 13.40 mg/L, 15,45 mg/L的對照品溶液。

吸取上述對照品溶液各10 μL注入液相色譜儀,記錄色譜圖以及米諾地爾的峰面積。以米諾地爾的質(zhì)量濃度對峰面積進(jìn)行線性回歸,得到回歸方程y=0.0164445x+0.136909,r=0.9998n=6)。結(jié)果表明,米諾地爾質(zhì)量濃度2.06mg/L-15.45 mg/L范圍內(nèi)有良好的線性,線性相關(guān)系數(shù)r大于0.999。以zui低濃度峰與基線噪音比值為1:3倍計(jì)算,測得zui低檢出濃度為0.6 mg/L

                          

圖1 米諾地爾標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

4.2 實(shí)際樣品分析

精密量取米諾地爾酊供試品溶液適量,稀釋至10 μg/mL。吸取上述對照品溶液10 μL注入液相色譜儀,進(jìn)樣三次,記錄色譜峰面積,使用外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果三次含量分別為105.8%,103.5%108.4%。

      

              圖2:米諾地爾對照品                        圖3 米諾地爾酊


圖4 米諾地爾酊重復(fù)性

4.3精密度實(shí)驗(yàn)

將上述5.15 mg/L ,13.40 mg/L兩種濃度的溶液連續(xù)測定5次,以峰面積考察其精密度,RSD分別為0.85%0.38%。均小于2%

4.4加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)

取已知含量(含米諾地爾5 μg/mL)的樣品4份,分別加入10.30 μg/mL,15.45 μg/mL的米諾地爾對照品溶液,制成2.58 μg/mL3.86 μg/mL的溶液各兩份。按照上述色譜條件進(jìn)樣,測定峰面積,計(jì)算回收率。

-----------------------------------1


表一 加樣回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=4)

樣品含量(ug/mL

加入量

ug/mL

測得量

ug/mL

回收率

%

%

RSD%

5.00

2.58

7.69

98.56



99.25



1.63

5.00

2.58

7.79

97.30

5.00

3.86

8.83

100.34

5.00

3.86

8.79

100.79


5討論與建議

本方法對于化妝品生發(fā)劑中的主要成分米諾地爾進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),選取相關(guān)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品對米諾地爾做標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性范圍良好,線性相關(guān)系數(shù)r大于0.999。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得出市售生發(fā)劑的米諾地爾含量,重復(fù)性好。

本實(shí)驗(yàn)通過相同低濃度的樣品重復(fù)進(jìn)樣得到該方法的精密度數(shù)據(jù),RSD遠(yuǎn)小于2%。取已知含量的樣品進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),回收率均大于97%。大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,LC-100適合對化妝品中生發(fā)成分米諾地爾進(jìn)行檢測。該方法操作簡單簡單,分析時間短,專屬性強(qiáng)??梢詽M足市售化妝品中米諾地爾含量的測定。

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